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동물 조직병리 분석서비스
Organization Analysis Service
조직병리 분석서비스
병리학적 변화 과정을 증명하기 위해 다양한 특수 염색법이 사용되고 있습니다. 이 염색기술에는 특정 조직의 구성요소에 대한 친화성을 갖는 염료 또는 화학물질을 일반적으로 사용합니다. 특수염색 중 흔하게 사용되고 있는 염색법은 아래와 같습니다. 이외에도 다양한 특수 염색법이 사용되고 있습니다. 또한 특수염색을 위해서는 조직검체의 전처리 등이 중요하므로 사전에 연락주시면 상세히 알려드리겠습니다.
결합조직 Connective Tissue Stains
Masson’s Trichrome Stain
Massons Trichrome 염색은 피부, 심장, 근육 등의 조직에서 콜라겐 기질(교원섬유)을 확인하는 데 사용됩니다.
Trichrome 염색을 통해 세포와 주변 결합조직을 구별할 수 있는 데 이것을 평가하면 조직 손상의 패턴을 판정하는 데 도움이 됩니다
(예, 간경변cirrhosis이 있는 경우 collagen이 증가).
또한 trichrome 염색은 여러 기관의 결합조직 피막, 위장관의 고유판, 폐의 기관지혈관 구조와 같은 정상적인 구조를 식별하는 데에도 도움이 됩니다.
Nuclei: black
Cytoplasm, keratin, muscle fibers: red/pink
Collagen, mucin: blue
Verhoff’s Elastic Stain
근동맥의 탄력판과 대동맥의 중막에는 탄력섬유가 포함되어 있기 때문에 elastic stain은 동맥의 윤곽을 확인하는데 도움이 됩니다.
탄성섬유 염색시 van Gieson 용액은 우수한 대비를 제공합니다.
Verhoeff Van Gieson/Elastica van Gieson, EVG 염색은 탄력조직의 위축이 나타나는 폐기종이나 동맥경화 등 다양한 혈관질환을 평가하는데 유용합니다.
Nuclei: dark brown
Elastic fiber: black
Collagenic fiber: red
Muscle: yellow
Reticulin Stain
Reticulin Stain은 조직 절편에서 세망 섬유(reticulin fiber) 식별을 위해 활용되는 우수한 염색입니다.
Reticulin은 구조적 완전성을 제공하는 III형 콜라겐이며 많은 기관(즉, 간, 신장, 비장)의 기저막에서 발견됩니다.
Reticulin 염색은 암종 및 육종과 같은 특정 유형의 종양 감별 진단에 유용하며 신생물의 성장패턴을 확인하는 데에도 도움이 됩니다.
Nuclei: gray
Reticulin fiber: black
Collagenic fiber: dark gray - purple
Phosphotungstic Acid-hematoxylin(PTAH) Stain
Phosphotungstic acid-hematoxylin(PTAH) 염색은 connective tissue(collagen, striated muscle, astrocytes 등)의 조직 시각화에 활용됩니다.
Striated muscle, nuclei, mitochondria, astrocytes: blue
Collagenic fiber: orange
탄수화물 Connective Tissue Stains
Colloidal Iron (“AMP”)
다가 콜로이드상 철입자와 탄수화물내 산성기의 이온 결합에 이용한 염색법입니다. 염화제2철을 사용하여 산성점액 다당류에 Fe3+를 결합시킨 후 Prussian blue 반을을 이용하여 간접적으로 산성점액다당류를 검출하는 방법입니다.
검체조직의 결합조직점액을 hyaluronidase로 전처리하면 점액의 hyaluronic acid가 제거되어 특이성이 높은 결과를 얻을 수 있습니다.
Acid mucopolysaccharides and sialomucins: deep blueNuclei: pink-red
Cytoplasm: pink
Counterstain: Nuclear-fast red
Alcian Blue Stain
Alcian blue는 산성점액물질에 대한 특이성, 강한
염색성, 염색의 불용성 그리고 영구적으로 안정된
염색성을 얻을 수 있어 다양한 산성점액물질의 검출에
일반적으로 사용되고 있습니다. pH를 조정하여
carboxyl group와 sulfate group을 가진 산성점액
물질을 구분할 수도 있습니다.
Verhoeff Van Gieson/Elastica van Gieson, EVG
염색은 탄력조직의 위축이 나타나는 폐기종이나 동맥
경화 등 다양한 혈관질환을 평가하는데 유용합니다.
pH 2.5에서는 carboxyl group와 sulfate group에 모두 결합하나 pH1에서는 sulfate group에만 결합 하며, 비만세포(mast cell)에 함유된 heparin도 pH1에서 양성반응을 보입니다.
Acidic Sulfated Mucosubstances: blue
Hyaluronic Acid: blue
Sialomucins: blue
Nuclei: red
Background: pink
Periodic Acid-Schiff (PAS) Stain
PAS(Periodic-Acid Schiff) 염색은 다당류, 뮤신, 글리코겐 및 곰팡이의 세포벽 성분과 같은 탄수화물 및 탄수화물 화합물의 존재를 입증하기 위해 조직학 연구에 사용되고 있습니다. PAS 염색은 골격근, 간, 심장 근육과 같은 조직에서 글리코겐을 검출하는 데 사용됩니다.
PAS 반응은 일부 다당류가 과요오드산(periodic acid) 과 반응하여 aldehyde를 생성하는 산화 과정으로 시작되며, 생성된 알데히드는 무색의 Schiffs fuchsin 과 반응하여 빨간색 혹은 분홍색 혹은 자홍색으로 나타납니다.
Hematoxylin 또는 methyl green은 핵을 염색하는 데 사용됩니다.
Glycogen과 mucin을 염색하지만 조직의 glycogen 을 제거하기 위해 diastase로 미리 소화시킬 수도 있습니다(diastase-PAS stain).
Neutral mucin and PAS positive: red or pink or magenta
Nuclei: black
Mucicarmine Stain
Mucicarmine 염색은 상피 기원의 mucin 검출에 있어 매우 특이적입니다.
편평 세포 암종과 선암종을 구별하여 식별하는 데 사용되는 데 위장관에서 기원하는 선암을 감지하는 데 특히유용합니다.
이 염색에서는 중성염색다당류와 강산성의 황산화 점액다당류는 음성(또는 약산성), 약산성의 carboxylated mucopolysaccaharide는 양성을 나타냅니다.
Mucosubstances: rose to red
Nuclei: black
색소, 무기질, 세포과립 Pigments, Minerals and Cytoplasmic Granules
Fontana-Masson for Melanin
Fontana-Masson 염색은 피부, 모발, 망막 또는 홍채 및 중추신경계의 일부에서 발견되는 멜라닌과 일반적으로 위와 소장에서 발견되는 argentaffin 과립을 식별하는 데 사용합니다.
조직 내 환원성기에 의해 ammoniacal silver nitrate(암모니아성 질산은 이온)가 환원되면 갈색 혹은 흑색의 콜로이드성 금속성 은이온으로 전환 됩니다. 그러나 이 염색법에서는 argentaffin, chromaffin과 일부 some lipochrome pigments도 검은색으로 염색됩니다.
Melanin, argentaffin, chromaffin: black
Nuclei: pink red
Cytoplasm: pale pink
Counter stain(nuclear fast red):
Melanin Bleach
Melanin Bleach는 세포 형태를 잘 보기 위해 멜라닌을 제거하는 것입니다.
이 방법은 potassium permanganate 또는 hydrogen peroxide와 같은 강력한 산화제를 사용 합니다. 눈(Ocular)의 멜라닌은 표백하는 데 몇 시간이 걸리는 반면 피부(skin)의 멜라닌은 몇 분이 걸립니다. 특히 면역조직화학 검사에서 melanin bleach를 시행하는 것은 판독간섭을 줄이는 데에 중요합니다.
Periodic Acid-Schiff (PAS) Stain
Iron Stain은 조직에서 철분을 입증하는 고전적인 방법입니다. 조직절편을 묽은 염산으로 처리하여 결합 단백질에서 철 이온을 방출시킵니다.
그다음 potassium ferrocyanide와 반응하여 불용성 청색 화합물을 생성합니다(Prussian blue reaction). 골수검체의 경우 수은 고정제가 포르말린보다 철분을 더 잘 보존하는 것으로 알려져 있습니다.
Iron: Bright blue
Nuclei: red
Backgroud: pink
Counter stain(nuclear fast red):
Von Kossa Stain
Von Kossa Stain(Calcium Stain)은 파라핀 절편 에서 칼슘 침전물을 조직학적으로 시각화하기 위해 사용하고 있습니다. 이 방법은 칼슘 자체에 특이적인 것이 아니라 조직을 질산은 용액으로 처리하고 강한 빛에 의해 환원된 칼슘을 대체하여 은을 침착시키므로 금속성 은으로 가시화될 수 있습니다.
Calcium salts: black to brown black
Nuclei: red
Cytoplasm: pink
Counter stain(nuclear fast red):
지방 Fat Stain
Oil Red O Stain
Oil red O stain(lipid stain)은 조직에서 중성 지질과 지방산을 식별합니다. 알코올이 포함된 fixative 또는 xylene을 이용한 투명과정에서 지질이 제거되기 때문 에 cryostat(냉동절편)를 이용한 절편이 필요합니다. 폐 조직에서 지방색전이나 말초 혈액의 응고절편을 식별하는 데 유용할 수 있습니다.
Fat cells: red
Neutral fat: red
Nuclei: blue